274 - FLYSYN: Ergebnisse der Erstanwendungsstudie des Fc-optimierten FLT3 Antikörper FLYSYN zur Behandlung der akuten myeloischen Leukämie mit minimaler Resterkrankung

Jonas S. Heitmann, Tübingen et al.

Nach Erreichen der vollständigen Remission (CR) zeigt etwa die Hälfte der AML-Patienten eine messbare Resterkrankung (MRD) und schließlich einen Rückfall. FLT3 / CD135 ist ein hochselektives Zielantigen für die Immuntherapie, das bei fast allen Patienten auf AML-Zellen exprimiert wird, während die Expression auf gesunden Geweben auf dendritischen Zellen, Monozyten und Vorläuferzellen auf niedrige Werte beschränkt ist. Hier berichten wir über die Ergebnisse einer offenen, einarmigen, multizentrischen Erststudie am Menschen (Rekrutierung März 2017 bis März 2020), in der die Sicherheit / Verträglichkeit und Wirksamkeit des Fc-optimierten FLT3-Antikörpers FLYSYN bei Patienten mit AML (NCT02789254) bewertet wurde.

Morphologische CR mit stabiler oder zunehmender MRD in zwei aufeinanderfolgenden Messungen unter Verwendung von zentralem RT-qPCR und / oder NGS bildeten das Haupteinschlusskriterium. FLYSYN wurde i.v. über 3 h verabreicht (Kohorte 1-5: einmalige Anwendung von 0,5mg/m², 1,5mg/m², 5mg/m², 15mg/m², 45mg/m²; Kohorte 6: 15mg/m² am Tag 1, 15 und 29). Pro Kohorte wurden drei Patienten behandelt, mit Ausnahme der Kohorten 4 und 6, die auf 9 bzw. 10 Patienten erweitert wurden. Das Ansprechen wurde definiert als >1 log MRD-Reduktion oder Negativität im Knochenmark (BM). 31 Patienten (Durchschnittsalter 58 Jahre; Bereich 21-80 Jahre; 20 (65%) Frauen) wurden eingeschlossen, von denen 27, 3 und 1 MRD-positiv für mutiertes NPM1, mutiertes IDH2 bzw. RUNX1-RUNX1T1 waren. Die Halbwertszeit von FLYSYN wurde auf 6,5 Tage geschätzt.

Bei 8 Patienten (26%) wurde eine vorübergehende Abnahme der Neutrophilenzahl (2 unerwünschte Ereignisse (AE) Grad 3, andere ≤ Grad 2) beobachtet. Bemerkenswerterweise wurde in der bisher analysierten Untergruppe von Patienten (n = 24) kein relevanter Effekt auf die Stammzellreserve festgestellt, wie durch CFU-Assays bewertet. Es wurden keine anderen Nebenwirkungen ≥ Grad 3 oder dosislimitierende Toxizität beobachtet. Die häufigsten Nebenwirkungen waren unspezifisch und umfassten Müdigkeit und grippeähnliche Symptome (12%), muskuloskelettale Symptome (8%) und Laboranomalien (42%).

Insgesamt wurde bei 11/31 Patienten (35%) ein molekulares Ansprechen auf die Behandlung erreicht, wobei bisher zwei Patienten, die ein Jahr nach der Behandlung eine MRD-Negativität erreichten, dokumentiert wurden. Bei Anwendung von 45mg/m² FLYSYN (insgesamt, einmalige oder wiederholte Dosierung) wurden bei 46% (6/13) der Patienten objektive Reaktionen erzielt, während 28% (5/18) auf die Behandlung mit niedrigeren Dosen ansprachen.

Die Ergebnisse unserer Phase-I-Studie zeigen, dass FLYSYN als Monotherapie bei AML-Patienten mit molekularer MRD sicher und sehr gut verträglich ist. Frühe Wirksamkeitsdaten sind vielversprechend und erfordern eine weitere Bewertung in einer bevorstehenden klinischen Phase-II-Studie.

 

483 - PET adaptierter Verzicht auf Radiotherapie beim intermediären Hodgkin Lymphom: Ergebnisse der HD17- Studie der German Hodgkin Study Group

Peter Borchmann, Köln, et al.

Einleitung: Die kombinierte Behandlung (CMT) mit Chemotherapie (CTx) und anschließender Strahlentherapie (RT) ist ein Standard für die Behandlung von Patienten mit einem ungünstigen Hodgkin-Lymphom (HL) im Frühstadium. Insgesamt ergibt diese Strategie eine gute Primärheilungsrate, aber die Verwendung einer Strahlentherapie wirft Bedenken hinsichtlich langfristiger Folgen auf. In der aktuellen HD17-Studie haben wir gefragt, ob die Strahlentherapie bei Patienten, die nach einer Chemotherapie eine vollständige metabolische Reaktion erzielen, sicher weggelassen werden kann.

Methoden: 1100 Patienten mit neu diagnostizierter, ungünstiger HL im Frühstadium wurden in diese internationale, randomisierte Phase-III-Studie eingeschlossen. Die Patienten wurden mit 4 Zyklen Chemotherapie einer CMT zugeordnet, gefolgt von einer 30Gy-RT- oder PET-gesteuerten Feldbehandlung, wobei die RT bei iPET-negativen Patienten weggelassen wurde (DS, Deauville-Score, <3). Hauptziele waren (1) Nichtunterlegenheit der iPET-gesteuerten Strategie in einer Pro-Protokoll-Analyse (PP) beider Behandlungsgruppen und (2) Bestätigung der iPET-Positivität (DS ≥3) als Risikofaktor für eine ITT-Analyse.

Ergebnisse: Von 979 Patienten mit bestätigtem iPET-Ergebnis waren 651 (66,5%) iPET-negativ, 238 (24,3%) hatten DS3 und 90 (9,2%) DS4. In der Standard-CMT-Gruppe (PP, n = 428) wurde das 5-Jahres-PFS auf 97,3% (95% CI, 94,5% bis 98,7%) geschätzt, verglichen mit 95,1% (95% CI, 92,0% bis 97,0% in der iPET-gesteuerten Behandlungsgruppe (PP, n = 477). Die 5-Jahres-PFS-Differenz zwischen den beiden Gruppen betrug -2,2% (95% -CI, -5,3% bis 0,9%), ohne die untere Marge von -8%. In der CMT / CTx + RT-Gruppe (n = 646) wurde das 5-Jahres-PFS für iPET-positive Patienten (n = 328) auf 94,2% (95% -CI, 90,1% bis 96,6%) geschätzt, verglichen mit 97,6% ( 95% -CI, 94,0% bis 99,9%) für iPET-negative Patienten (n = 318). Die Hazard Ratio für die Differenz betrug 3,03 (95% CI, 1,1% bis 8,3%), was iPET als signifikanten Risikofaktor bestätigt. Der Unterschied war ausgeprägter, wenn DS4 als Grenzwert für die Positivität verwendet wurde: Die 5-Jahres-PFS-Raten betrugen 81,6% (95% -CI, 67,9% bis 89,9%) für DS4-Patienten gegenüber 98,1% (95% -CI, 95,9%) bis 99,1%) bei DS1-3-Patienten.

Schlussfolgerung: In einem ungünstigen HL im Frühstadium, das mit einer „2 + 2“ -Chemotherapie behandelt wurde, weist ein positiver iPET auf ein Risiko für ein Versagen der Behandlung hin, insbesondere für den geringen Anteil der Patienten (90/979, 9,2%) mit DS4. Bei iPET-negativen Patienten ist das PFS bei Patienten, die nur mit Chemotherapie behandelt wurden, der Standard-CMT nicht unterlegen. Zusammenfassend lässt sich sagen, dass der iPET-gesteuerte individualisierte Behandlungsansatz bei den meisten Patienten auf die Strahlentherapie zu verzichten erlaubt und gleichzeitig die sehr hohe Primärheilungsrate beibehalten wird.

 

619 - Stromales SFRP1 steuert das Verhalten von hämatopoetischen Stammzellen über die PP2A-vermittelte Regulation von CTNNB1 / EP300

Franziska Hettler, München, et al.

Wir haben zuvor festgestellt, dass eine Sfrp1-Knockout-Umgebung die Regeneration von hämatopoetischen Stammzellen (HSC)  nicht unterstützt (Renström et al., 2009). Um die zellspezifischen Anforderungen des Sfrp1-Gens zu analysieren, haben wir den Sfrp1flox / Flox-Mausstamm etabliert und das Sfrp1-Gen in Osterix + (Sp7) -Ostteolineage-Zellen deletiert. Bei diesen Osx-Cre, Sfrp1Δ/Δ (OS1Δ/Δ) - Mäusen ist die Anzahl der MSCs verringert, diese zeigen jedoch einen erhöhten Anteil an koloniebildenden Einheiten (CFU-F). Darüber hinaus zeigen ex vivo gezüchtete Stromazellen eine erhöhte seneszenzassoziierte b-Galactosidase-Färbung. Zusätzlich differenzierten sich die von CFU-F abgeleiteten Stromazellen spontan zu Adipozyten. Diese Befunde weisen auf eine veränderte Funktionalität von Stromazellen aus OS1Δ/Δ-Mäusen hin.

Im hämatopoetischen Kompartiment dieser Mäuse fanden wir eine Abnahme der myeloischen Vorläufer im Knochenmark (BM) bei gleichzeitiger Zunahme der CD11b + GR1hi-Granulozyten im peripheren Blut. Obwohl die Anzahl der primitiven CD34-CD48-CD150 + HSCs (LT-HSCs) im BM unverändert war, konnten sich LT-HSCs von OS1Δ/Δ-Mäusen bei Wildtyp-Empfängern nicht neu besiedeln. In Einzelzellkulturen fanden wir, dass LT-HSCs von OS1Δ/Δ-Mäusen eine verringerte Proliferation bei gleichzeitiger erhöhter Differenzierung in reife myeloide Zellen zeigen, was mit einer erhöhten DNA-Schädigung verbunden war, wie mit Kometenschwanzassays und Färbung auf gammaH2.AX gezeigt wurde. Auf molekularer Ebene fanden wir, dass LT-HSCs von OS1Δ/Δ-Mäusen erhöhte CTNNB1-Proteinspiegel zeigen.

CTNNB1 reguliert die Zelldifferenzierung und Proliferation von Stammzellen durch Bindung an Ep300 bzw. CBP (Miyabayashi et al., 2007). Interessanterweise war der CBP-Proteinspiegel in LT-HSCs von OS1Δ/Δ-Mäusen verringert, während Ep300 erhöht war, was auf eine Überaktivierung der CTNNB1 / Ep300-Achse hinweist. In der Tat haben wir durch Blockierung der CTNNB1 / Ep300-Bindung mit dem spezifischen PP2A-Inhibitor IQ-1 nicht nur das aberrante Verhalten vonOS1Δ/Δ LT-HSC in vitro gerettet, sondern auch die Repopulationsaktivität dieser LT-HSCs in vivo wiederhergestellt.

Unsere Ergebnisse legen nahe, dass die Deletion von stromalem SFRP1 die Repopulationsaktivität von LT-HSCs verringert, indem die Differenzierung durch PP2A-vermittelte Dephosphorylierung der Phospho-Ep300-Bindungsstelle mit CTNNB1 erhöht wird.

Renstroem et al., Cell Stem Cell. 2009; 5: 157-67
Miyabayashi et al., Proc Natl Acad Sci USA 2007; 104: 5668-73.

 

577 - Klinische Ergebnisse nach autologer hematopoetischer Stammzelltransplantation mit betibeglogene autotemcel (beti-cel, LentiGlobin für β-thalassämie) Gentherapie

in Phase 3 Nothstar-2 und Northstar-3 Studien in transfusions-abhängiger β-thalassämie (TDT).

Andreas E. Kulozik, Heidelberg, et al.

Einleitung: In der Phase-1/2-Northstar-Studie (HGB-204) von Beticel zeigten Patienten, die eine Transfusionsunabhängigkeit (TI) erreichten, eine verbesserte Erythropoese und eine Verringerung des mittleren Serumferritins (4829 [n = 10] bis 937) von der Grundlinie auf 48 Monate [n = 7] pmol / l) und Lebereisenspiegel (6,3 [n = 11] bis 2,0 [n = 7] mg / g dw). Wir präsentieren Zwischenergebnisse der Phase 3 von Northstar-2 (NCT02906202; HGB-207; Nicht-β0 / β0-Genotypen) und Northstar-3 (NCT03207009; HGB-212; β0 / β0, β0 / β + IVS-I-110 oder β) + IVS-I-110 / β + IVS-I-110).

Methoden: CD34 + hämatopoetische Stammzellen, die durch Mobilisierung / Apherese gesammelt wurden, wurden mit dem lentiviralen Vektor BB305 transduziert und Patienten nach PK-angepasster Busulfan-Myeloablation als Einzelwirkstoff infundiert. Statistiken sind Median (Min-Max).

Ergebnisse: Bis zum 3. März 2020 wurden 38 Patienten (25 ≥ 12 Jahre alt) in Northstar-2 und -3 behandelt, mit einer Nachbeobachtungszeit von 19,4 (1,2-36,2) und 14,4 (1,1-24,0) Monaten.
In Northstar-2 stoppten 20/22 Patienten mit einer Nachbeobachtungszeit von ≥ 6 Monaten die Transfusionen. 17/19 auswertbare Patienten erreichten den primären Endpunkt (TI: gewichteter durchschnittlicher Hb ≥ 9 g / dl ohne RBC-Transfusionen ≥ 12 Monate); Die laufende TI-Dauer betrug 19,4 (12,3-31,4) Monate. Das gewichtete durchschnittliche Hb während des TI betrug 11,9 (9,4-12,9) g / dl. Von der Gentherapie abgeleitetes HbAT87Q (* bei Patienten ohne RBC-Transfusion ≥ 60 Tage) betrug 8,7, 8,9, 9,3g/dl in den Monaten 6 (n = 19), 12 (n = 19) bzw. 18 (n = 15). Das Verhältnis von Myeloid zu Erythroid bei Patienten, die einen TI erreichten, betrug 1: 1,2 und 1: 1,1 in den Monaten 12 (n = 16) und 24 (n = 8), gegenüber 1: 3 zu Studienbeginn (n = 17), was auf eine verbesserte Erythropoese hinweist.
In Northstar-3 hatten 11/13 Patienten keine Transfusionen> 6 Monate. Das gesamte Hb * und HbAT87Q * betrug 10,1 (8,5-13,2) und 8,6 (3,8-12,0) g/dl im Monat 6 (n = 12) und 10,5 (7,9-14,0) und 8,7 (4,4-12,6) g/dl bei Monat 12 (n = 10). 6/8 auswertbare Patienten erreichten TI.
Nicht hämatologische Grade ≥3 UE bei ≥3 Patienten in beiden Studien waren Stomatitis (n = 19), fieberhafte Neutropenie (n = 17), Epistaxis (n = 6), Pyrexie (n = 5), veno-okklusive Lebererkrankung ( n = 3). Arzneimittelbedingte Nebenwirkungen waren Bauchschmerzen (n = 3), Thrombozytopenie (n = 3), Leukopenie (n = 1), Neutropenie (n = 1), Tachykardie (n = 1), Schmerzen in den Extremitäten (n = 1). Alle Proben zeigten eine polyklonale Vektorintegration.

Schlussfolgerungen: Nach Beticel-Gentherapie haben 20/22 Patienten (nicht-β0/β0) und 11/13 Patienten (β0/β0, β0/β+IVS-I-110 oder β + IVS-I-110 / β +) IVS-I-110) mit TDT und einer Nachbeobachtungszeit von ≥ 6 Monaten haben die Transfusionen gestoppt. 89% und 75% der auswertbaren Patienten in Northstar-2 und -3 erreichten einen TI. Die Sicherheit stimmt mit der der Busulfan-Myeloablation als Einzelwirkstoff überein.

 

302 - Therapie mit CD19-gerichteten chimären Antigen-Rezeptor (CAR) T-Zellen der dritten Generation – Ergebnisse der Heidelberger CAR-1 (HD-CAR-1)-Studie

Maria-Luisa Schubert, Heidelberg, , et al.

Einleitung: HD-CAR-1 ist eine von Forschern initiierte Phase-I/II-Studie zur Untersuchung der Sicherheit und Durchführbarkeit eines CD19-CAR-Konstrukts der dritten Generation (SFG.CD19.CD28-4-1BBzeta) mit den kostimulatorischen Domänen CD28 und 4 -1BB (CD137). Leukapherese, Herstellung und Verabreichung von CAR-T-Zellen (CARTs), Patientenüberwachung und Nachverfolgung von HD-CAR-1 werden intern durchgeführt.

Methoden: Patienten mit rezidivierter oder refraktärer (r/r) akuter lymphoblastischer Leukämie (ALL) oder r/r Non-Hodgkin-Lymphom (NHL) einschließlich chronischer lymphatischer Leukämie (CLL), diffusem großzelligem B-Zell-Lymphom (DLBCL), follikulärem Lymphom (FL) oder Mantelzelllymphom (MCL) kamen für die Behandlung in Frage. HD-CAR-1 evaluierte eskalierende CART-Dosen (1-20 × 10 6 CARTs /m2) nach Lymphodepletion mit Fludarabin und Cyclophosphamid (90 mg/m2 bzw. 1500 mg/m2). Die Patienten wurden bezüglich Cytokin-Release-Syndrom (CRS), Immuneffektorzell-assoziiertes Neurotoxizitätssyndrom (ICANS) und andere Toxizitäten überwacht. In-vivo-Funktion, Überleben und Antitumorwirksamkeit von CARTs wurden bewertet.

Ergebnisse: 22 Patienten wurden eingeschlossen und 19 Patienten (9 erwachsene ALL-Patienten, 2 CLL, 3 MCL, 4 DLBCL, 1 FL) erhielten CARTs (6 Patienten 106 CARTs/m2; 6 Patienten 5 × 106 CARTs/m2; 7 Patienten 20 × 106 CARTs/m2). Die CART-Produktion war für alle eingeschlossenen Patienten erfolgreich. Zwei Patienten erhielten aufgrund des Fortschreitens oder einer unkontrollierten Hepatitis B-Infektion keine Behandlung. Ein Patient wartet auf die Behandlung. Zwei Patienten entwickelten CRS ≥ III °. Beide Patienten wurden mit Tocilizumab behandelt, einer zusätzlich mit Steroiden. Es wurden keine ICANS ≥ Grad III beobachtet. CARTs waren im peripheren Blut (PB) von 18 von 19 analysierten Patienten nachweisbar.
Die Gesamtansprechrate (ORR) der behandelten Patienten betrug 63%, wobei 42% ein vollständiges Ansprechen (CR) erreichten. In Bezug auf Krankheitsentitäten erreichten ALL-Patienten eine ORR von 77% (alle CRs), wobei 66% MRD-Negativität zeigten. In der NHL-Kohorte wurde eine ORR von 50% erreicht. Das Ansprechen war mit einer höheren CART-Dosis verbunden, da 79% der mit 20 × 10 6 CARTs/m2 behandelten Patienten auf die Behandlung ansprachen. Bei den Dosisstufen I (106 CARTs/m2) und II (5 × 106 CARTs/m2) wurden bei 66% bzw. 50% der Patienten Reaktionen erzielt.

Schlussfolgerung: Leukapherese und CART-Herstellung der dritten Generation waren bei allen eingeschlossenen Patienten wirksam. Insbesondere ALL-Patienten sprachen dosisabhängig auf die Behandlung an. Das HD-CAR-1 CART-Produkt schien selbst bei niedrigen Dosierungen effizient zu sein und zeigte ein ausgezeichnetes Sicherheitsprofil.

 

202 - Entrectinib bei NTRK-Fusions-positivem Sarkom: Integrierte Analyse der STATRK-2, STARTRK-1 und ALKA-372-001 Studien

Jürgen Wolf, Köln,et al.

Einleitung: NTRK-Genfusionen in NTRK1, NTRK2 und NTRK3 wirken als onkogene Treiber bei verschiedenen Tumortypen, einschließlich Sarkomen, und sind potenzielle therapeutische Ziele. Entrectinib ist ein ZNS-aktiver, wirksamer Inhibitor von TRKA / B / C und ROS1. Wir präsentieren integrierte Daten zur Wirksamkeit und Sicherheit aus drei Studien mit Entrectinib bei NTRK-fusionspositiven soliden Tumoren mit Schwerpunkt auf Sarkomen.

Methoden: Patienten mit lokal fortgeschrittenen / metastasierten NTRK-Fusions-positiven Tumoren (mit/ohne ZNS-Grundkrankheit), die durch nukleinsäurebasierte Methoden bestätigt wurden, wurden in drei globale Phase-1/2-Entrectinib-Studien eingeschlossen (>150 Standorte/15 Länder: ALKA-372-001 [EudraCT 2012-000148-88], STARTRK-1 [NCT02097810], STARTRK-2 [NCT02568267]). Die Population mit integrierter Wirksamkeitsbewertung umfasste TRK-Inhibitor-naive Erwachsene mit extrakraniellen soliden Tumoren, die eine einzige in-frame NTRK-Fusion mit messbarer Krankheit zu Studienbeginn aufwiesen. Die Krankheitslast wurde pro BICR unter Verwendung von RECIST v1.1 nach Zyklus 1 (4 Wochen) und danach alle 8 Wochen bewertet. Primäre Endpunkte waren ORR und DOR von BICR. Zu den sekundären Endpunkten gehörten PFS, OS und Sicherheit.

Ergebnisse: Die durch die Wirksamkeit auswertbare Population umfasste 54 Patienten (10 Tumortypen; >19 Histopathologien). Bei 13 Patienten mit NTRK-Fusions-positiven Sarkomen wurden NTRK1- und NTRK3-Genfusionen nachgewiesen (53,8% und 46,2%). Sechs Subtypen von Weichteilsarkomen und sieben Fälle von nicht anderweitig spezifizierten Sarkomen wurden gemeldet. Das Durchschnittsalter betrug 53 Jahre (Bereich 21-81), 46,2% der Patienten gaben ≥2 vorherige systemische Therapien an und alle hatten einen ECOG-Leistungsstatus von 0/1 (61,5% / 38,5%). Kein pt hatte Grundlinien-ZNS-Metastasen. Die ORR nach BICR betrug 46,2% (95% CI 19,22-74,87), alle waren PRs. Vier Patienten (30,8%) hatten SD, 1 (7,7%) hatte ein Fortschreiten der Krankheit und 2 hatten fehlende / nicht auswertbare Daten. Mediane (95% CI) DOR, PFS und OS waren: 10,3 (4,6-15,0), 11,0 (6,5-15,7) und 16,8 (10,6-20,9) Monate. Die mediane Behandlungsdauer betrug 4,6 Monate. Die Sicherheitspopulation erhielt ≥ 1 Dosis Entrectinib; Die Patienten gaben an Nebenwirkungen vom Grad 1/2 (60,5%), Grad 3 (27,6%), Grad 4 (3,4%) jedoch keine behandlungsbedingten Nebenwirkungen (TRAEs) vom Grad 5 zu haben. Die häufigsten TRAEs waren Dysgeusie (41,4%), Müdigkeit (27,9%), Schwindel (25,4%) und Verstopfung (23,7%). TRAEs führten bei 27,3% zu Dosisreduktionen, bei 25,4% zu Unterbrechungen und bei 3,9% der Patienten zu Abbrüchen.

Schlussfolgerung: In dieser integrierten Analyse globaler multizentrischer klinischer Studien wurde Entrectinib gut vertragen und induzierte klinisch bedeutsame, dauerhafte Reaktionen bei Patienten mit NTRK-Fusions-positiven Sarkomen.